Semmelweis TDK kérdések és válaszok

Forgách László, Gyógyszerésztudományok I. szekció, III. hely

Berlini kék nanorészecske pegilálási protokolljának kidolgozása és tesztelése in vivo rendszerben FOBI segítségével

1. Kérdés:  Milyen volt a jelöletlen PEG nélküli részecske stabilitása?

A PEG nélküli részecskére vonatkozó stabilitási adatok megtalálhatóak a bemutatott ábraanyagomban. Az összesített táblázat alapján, pegilált részecskékkel összehasonlítva a natív PBNP-k mérete a vizsgált időtartam alatt állandónak tekinthető. Ez volt a feltétele annak, hogy a részecskéket pegilálhassuk.

2. Kérdés: Mi alapján esett a választás a PEG-re?

Részecskéink hidrofilitását növelni szerettük volna, erre köztudottan a PEG alkalmas. Nem mellékes megemlíteni a PEG sztérikus stabilizáló tulajdonságát, illetve hogy a részecskék a PEG által a szervezetben rejtve maradhatnak.

3. Kérdés: Milyen körülmények között volt tárolva és mérve a minta?

Mintáimat hűtőszekrényben, 4°C-on tároltuk, a mérés 37°C-os inkubáció mellett történt a DLS készülékkel.

4. Kérdés: Hogyan számolta ki a v/v%-ot ha szilárd porból indult ki?

A berlini kék részecskéből mindig egységnyi térfogatú, 0,5 ml oldatot számoltam. A PEG-ekből 10%-os oldatot készítettem, és ezt mikropipetta segítségével adtam hozzá a PBNP-hez. Ebből kiszámítható a térfogat százalékos összetétel.

5. Kérdés: A stabilitást mindig a részecskeméret alapján határoztuk meg? Az iparban a stabilitást kinetikai és aggregációs állandóságban mérik.

Jelen körülmények között úgy gondoltam, hogy a DLS készülék által szolgáltatott adatokból megfelelően tudok következtetni a részecskék stabilitására. Terveim között szerepel, hogy iparban alkalmazott, gyorsított stabilitásvizsgálatnak (40°C, 75-80% páratartalom) is alávetem a nanorendszert. Természetesen lehetőséget látok specifikus kinetikai vizsgálatok fejlesztésére is.

6. Kérdés: Ec. Térben milyen ionok adszorbeálódnak a részecske felszínére? Hogyan lehet ezektől megszabadulni?

Ez az adott résztől függ. Ezek az ionok természetesen fiziológiásan előforduló ionok, tehát Cl, Mg, Ca, stb. attól függően, fogy milyen a részecském felületi töltése, melyet nagy mértékben befolyásolhat a szöveti pH. (Az ionoktól többszöri mosás illetve dialízis segítségével meg lehet szabadulni)

Megjegyzés: Túlzott optimizmusra vall hogy részecske méretét század pontossággal adjuk meg …

7. Kérdés: A pegilált részecskék méretnövekedése miatt ipari körülmények közt kidobnak ezt a részecskéket, de ha sikerül megoldani a stabilitási problémát  jó lehet.

A részecskék stabilitásának növelése, illetve új lehetőségek keresése a terveink között szerepel.

8. Kérdés: Érdemes lenne összehasonlítani hogy viselkedik/ürül a nem pegilalt és pegilalt részecske.

Erre irányuló vizsgálatot tervezünk. Lehetőséget látok mind az ürülés gyorsítására - sikeres pegilálással, mind pedig az ürülés és metabolizmus visszaszorítására például szendvics szerkezetű részecskével - aminosavat használva croslinkerként megoldható lenne a méret növelés, és a filtráció visszaszorítható. A szendvics szerkezet lehetőséget ad izotópok kapcsolására, illetve a metabolizáló enzimektől való elzárása, így a keringésben töltött idő nagy mértékben növelhető lehet.